gözleg

Ösümlik efir ýaglaryna esaslanýan terpen birleşmeleriniň, Aedes aegypti garşy gurçuk we ulularyň serişdesi hökmünde birleşmegi (Diptera: Culicidae)

Nature.com-a gireniňiz üçin sag boluň.Ulanylýan brauzeriňiziň wersiýasynda CSS goldawy çäklidir.Iň oňat netijeler üçin brauzeriňiziň has täze wersiýasyny ulanmagy maslahat berýäris (ýa-da Internet Explorer-de Gabat geliş tertibini öçüriň).Şol aralykda, dowamly goldawy üpjün etmek üçin sahypany stil ýa-da JavaScript görkezmeýäris.
Ösümlikden alnan insektisid birleşmeleriniň birleşmegi, zyýankeşlere garşy sinergistik ýa-da antagonistik täsirleri görkezip biler.Aedes çybynlary tarapyndan alnyp barylýan keselleriň çalt ýaýramagyny we Aedes çybyn populýasiýasynyň adaty insektisidlere garşy barha artýan garşylygyny göz öňünde tutup, ösümlik efir ýaglaryna esaslanýan terpen birleşmeleriniň ýigrimi sekiz kombinasiýasy Aedes aegypti-iň gurçuk we ululyk döwründe synag edildi.Bäş ösümlik efir ýagy (EO) ilkibaşda ululykdaky we ululary ulanmagyň netijeliligi üçin bahalandyryldy we GC-MS netijelerine esaslanyp her EO-da iki sany esasy birleşme kesgitlenildi.Kesgitlenen birleşmeler diallyl disulfid, diallyl trisulfid, karwon, limonen, eugenol, metil eugenol, ewkaliptol, eudesmol we çybyn alfa-pinen satyn alyndy.Soňra bu birleşmeleriň ikilik kombinasiýalary subletal dozalary ulanyp taýýarlandy we olaryň sinergistik we antagonistik täsirleri synagdan geçirildi we kesgitlenildi.Iň oňat larwisid kompozisiýalary limoneni diallyl disulfid bilen garyşdyrmak arkaly, iň oňat ululyk kompozisiýalary karwony limonen bilen garyşdyrmak arkaly alynýar.Söwda bilen ulanylýan sintetiki larwisid Temphos we uly ýaşly derman Malathion aýratyn we terpenoidler bilen ikilik kombinasiýalarynda synag edildi.Netijeler temephos bilen diallyl disulfid bilen malathion we eudesmolyň birleşmesiniň iň täsirli kombinasiýa bolandygyny görkezdi.Bu güýçli kombinasiýalar “Aedes aegypti” -e garşy ulanmak üçin mümkinçilikleri saklaýar.
Ösümlik efir ýaglary (EO) dürli bioaktiw birleşmeleri öz içine alýan ikinji metabolitler bolup, sintetiki pestisidlere alternatiwa hökmünde möhüm ähmiýete eýe bolýar.Diňe ekologiýa taýdan arassa we ulanyjy üçin amatly bolman, eýsem dürli bioaktiw birleşmeleriň garyndysy bolup, neşe garşylygy ösmek ähtimallygyny hem azaldar1.Gözlegçiler GC-MS tehnologiýasyny ulanyp, dürli ösümlik efir ýaglarynyň düzümini gözden geçirdiler we 17,500 aromatiki ösümliklerden 3000-den gowrak birleşmäni kesgitlediler2, olaryň köpüsi insektisid häsiýetleri üçin synag edildi we insektisid täsirleriniň bardygyny habar berdiler3,4.Käbir gözlegler birleşmäniň esasy düzüm böleginiň zäherliliginiň çig etilen oksidi bilen deňdigini ýa-da uludygyny görkezýär.Individualöne aýry-aýry birleşmeleriň ulanylmagy, himiki insektisidlerdäki ýaly, garşylygyň ösmegine ýene bir ýer goýup biler.Şonuň üçin häzirki üns insektisidiň täsirini ýokarlandyrmak we zyýanly mör-möjekleriň populýasiýasynda garşylyk ähtimallygyny azaltmak üçin etilen oksidi esasly birleşmeleriň garyndylaryny taýýarlamaga gönükdirilendir.EO-larda bar bolan aýratyn işjeň birleşmeler, EO-nyň umumy işjeňligini görkezýän kombinasiýalarda sinergistik ýa-da antagonistik täsirleri görkezip biler, bu öňki gözlegçiler tarapyndan geçirilen gözleglerde gowy nygtaldy7,8.Wektor dolandyryş programmasy EO we onuň böleklerini hem öz içine alýar.Efir ýaglarynyň çybynçylyk işjeňligi Culex we Anopheles çybynlarynda giňden öwrenildi.Birnäçe gözleg, umumy zäherliligi ýokarlandyrmak we zyýanly täsirleri azaltmak üçin dürli ösümlikleri täjirçilik taýdan ulanylýan sintetiki pestisidler bilen birleşdirip, täsirli pestisidleri ösdürmäge synanyşdy9.Emma “Aedes aegypti” -e garşy şeýle birleşmeleri öwrenmek seýrek bolýar.Lukmançylyk ylmynda gazanylan üstünlikler we neşe serişdeleriniň we sanjymlaryň ösüşi käbir wektorly kesellere garşy göreşmäge kömek etdi.Emma wirusyň dürli serotipleriniň bolmagy, Aedes aegypti çybyn tarapyndan ýokaşmagy, sanjym programmalarynyň şowsuz bolmagyna sebäp boldy.Şonuň üçin şeýle keseller ýüze çykanda keseliň ýaýramagynyň öňüni almak üçin wektor gözegçilik programmalary ýeke-täk wariantdyr.Häzirki ssenariýada, Aedes aegypti-e gözegçilik etmek gaty möhümdir, sebäbi dürli wiruslaryň we olaryň serotipleriniň dengiz gyzzyrmasyny, Zika, dengiz gemorragiki gyzzyrmasyny, sary gyzgyny we ş.m. döredýän esasy wektorydyr. Iň bellemeli zat, sanynyň bolmagydyr. Wektorly Aedes bilen baglanyşykly keselleriň hemmesi diýen ýaly Müsürde ýylsaýyn köpelýär we dünýäde köpelýär.Şonuň üçin bu kontekstde Aedes aegypti ilaty üçin ekologiýa taýdan arassa we täsirli gözegçilik çärelerini işläp düzmek zerur.Bu ugurda potensial dalaşgärler EO-lar, olaryň düzüm bölekleri we kombinasiýalarydyr.Şonuň üçin bu gözleg, Aedes aegypti garşy bäş ösümlikden (ýagny, nan, mukaddes reyhan, Ewkalipt tegmili, Allium kükürdi we melaleuca) esasy ösümlik EO birleşmeleriniň täsirli sinergistik birleşmelerini kesgitlemäge synanyşdy.
Selectedhli saýlanan EO-lar 0,42-den 163,65 ppm aralygynda 24 sagat LC50 bilen Aedes aegypti-e garşy potensial larwisid işjeňligini görkezdiler.Iň ýokary gurçuk işjeňligi 24 sagatda LC50 bahasy 0,42 ppm bolan narpyz (Mp) EO üçin hasaba alyndy, soňra LC50 bahasy 16.19 ppm bolan sarymsak (As) 24 sagatda hasaba alyndy (1-nji tablisa).
“Ocimum Sainttum”, Os EO-dan başga, dört sany ekranlaşdyrylan EO-nyň hemmesi aç-açan allergid täsirini görkezdi, LC50 bahalary 24 sagatlyk täsir ediş döwründe 23.37-den 120,16 ppm aralygynda.Timofil striata (Cl) EO, 24 sagadyň dowamynda LC50 bahasy 23.37 ppm bolan ululary öldürmekde iň täsirli boldy, LC50 bahasy 101,91 ppm bolan Ewkalipt makulata (Em) (1-nji tablisa).Beýleki tarapdan, Os üçin LC50 bahasy iň ýokary dozada 53% hasaba alnandygy üçin entek kesgitlenmedi (Goşmaça 3-nji surat).
Her EO-da iki sany esasy birleşme NIST kitaphanasynyň maglumatlar binýadynyň netijelerine, GC hromatogram meýdanynyň göterimine we MS spektr netijelerine esaslanyp kesgitlenildi we saýlandy (2-nji tablisa).EO As üçin kesgitlenen esasy birleşmeler diallyl disulfid we diallyl trisulfid;EO Mp üçin kesgitlenen esasy birleşmeler karwon we limonen, EO Em üçin kesgitlenen esasy birleşmeler eudesmol we ewkaliptol;EO Os üçin kesgitlenen esasy birleşmeler eugenol we metil eugenol, EO Cl üçin kesgitlenen esasy birleşmeler eugenol we α-pinen boldy (1-nji surat, 5–8 goşmaça suratlar, goşmaça tablisa 1-5).
Saýlanan efir ýaglarynyň esasy terpenoidleriniň köpçülikleýin spektrometriýasynyň netijeleri (A-diallyl disulfid; B-diallyl trisulfid; C-eugenol; D-metil eugenol; E-limonene; F-aromatic ceperone; G-α-pinene; H-cineole; R-eudamol);
Jemi dokuz birleşme (dially disulfid, diallyl trisulfid, eugenol, metil eugenol, karwon, limonen, ewkaliptol, eudesmol, α-pinen) EO-nyň esasy düzüm bölekleri bolup, liçinkalarda Aedes aegypti-e garşy bioassaýed edildi. tapgyrlary..Birleşýän eudesmol, 24 sagat täsir edenden soň LC50 bahasy 2.25 ppm bolan iň ýokary larwisid işjeňligine eýe boldy.Diallyl disulfid we diallyl trisulfid birleşmeleriniň hem 10–20 ppm aralygynda orta subletal dozalar bilen potensial larwisid täsiriniň bardygy anyklandy.Eugenol, limonen we ewkaliptol birleşmeleri üçin LC50 bahasy 63.35 ppm, 139.29 ppm bolan orta liçinkalar işjeňligi ýene-de syn edildi.we 24 sagatdan soň 181.33 ppm (3-nji tablisa).Şeýle-de bolsa, iň ýokary dozalarda-da metil eugenolyň we karwonyň ​​düýpli larwisid potensialy tapylmady, şonuň üçin LC50 bahalary hasaplanmady (3-nji tablisa).Sintetiki larwisid Temephos, 24 sagadyň dowamynda Aedes aegypti garşy ortaça 0,43 ppm konsentrasiýasyna eýe boldy (3-nji tablisa, goşmaça tablisa 6).
Sevenedi birleşme (diallyl disulfid, diallyl trisulfid, ewkaliptol, α-pinen, eudesmol, limonen we karwon) täsirli EO-nyň esasy birleşmeleri hökmünde kesgitlenildi we uly ýaşly Müsür Aedes çybynlaryna garşy aýratyn synag edildi.Probit regressiýa derňewine görä, Eudesmol LC50 bahasy 1,82 ppm bolan iň ýokary potensiala eýe, 24 sagatlyk täsir wagtynda LC50 bahasy 17,60 ppm bolan Ewkaliptol.Synagdan galan bäş birleşme, 140.79-dan 737.01 ppm aralygynda LC50-ler bilen ulular üçin ortaça zyýanlydy (3-nji tablisa).Sintetiki organofosfor malationy, eudesmoldan has güýçli we beýleki alty birleşmeden has ýokarydy, 24 sagatlyk täsir ediş döwründe LC50 bahasy 5.44 ppm (3-nji tablisa, Goşmaça tablisa 6).
LC50 dozalarynyň ikilik kombinasiýalaryny 1: 1 nisbatynda düzmek üçin ýedi güýçli gurşun birleşmesi we organofosfor tamefosaty saýlandy.Jemi 28 ikilik kombinasiýa taýýarlandy we Aedes aegypti-e garşy gurçuk täsirliligi üçin synag edildi.Dokuz kombinasiýa sinergistik, 14 kombinasiýa garşy, bäş kombinasiýa bolsa liçisid däldi.Synergistik kombinasiýalaryň arasynda dially disulfid bilen temofolyň kombinasiýasy iň täsirli boldy, 24 sagatdan soň 100% ölüm derejesi hasaba alyndy (4-nji tablisa).Şonuň ýaly-da, limoniniň dially disulfid bilen eugenolyň timetfos bilen garyndylary 98,3% ölýän liçinkalar bilen oňat potensialy görkezdi (5-nji tablisa).Galan 4 kombinasiýa, ýagny eudesmol plus ewkaliptol, eudesmol plus limonen, ewkaliptol we alfa-pinen, alfa-pinene we temephos hem ölmegiň derejesi 90% -den ýokary bolup, larwisid effektini görkezdi.Garaşylýan ölüm derejesi 60-75% töweregi.(4-nji tablisa).Şeýle-de bolsa, limoneniň α-pinen ýa-da ewkalipt bilen birleşmegi antagonistik reaksiýalary görkezdi.Şonuň ýaly-da, Temephosyň eugenol ýa-da ewkalipt ýa-da eudesmol ýa-da diallyl trisulfid bilen garyndylarynyň antagonistik täsirleri bar.Edil şonuň ýaly-da, dially disulfid bilen diallyl trisulfidiň birleşmegi we bu birleşmeleriň ikisiniň hem eudesmol ýa-da eugenol bilen birleşmegi, liçinkalar hereketinde garşylyklydyr.Garşylyk, eudesmolyň eugenol ýa-da pin-pinen bilen birleşmegi bilen habar berildi.
Ulularyň kislotaly işjeňligi üçin barlanan 28 ikilik garyndysynyň 7-siniň sinergistik, 6-synyň täsiri ýokdy we 15-si garşydaşdy.Eudesmolyň ewkalipt bilen limoneniň karwon bilen garyndylary beýleki sinergistik kombinasiýalara garanyňda has täsirli bolup, ölüm derejesi degişlilikde 76% we 100% bolýar (5-nji tablisa).Malation, limonen we diallyl trisulfidden başga birleşmeleriň birleşmesi bilen sinergistik täsiri görkezmek üçin syn edildi.Beýleki tarapdan, diallyl disulfid bilen diallyl trisulfidiň we olaryň ikisiniň hem ewkalipt, ýa-da ewkaliptol, ýa-da karwon ýa-da limonen bilen birleşmeginiň arasynda duşmançylyk tapyldy.Şonuň ýaly-da, α-pineniň eudesmol ýa-da limonen, ewkaliptol karwon ýa-da limonen, limoneniň eudesmol ýa-da malation bilen birleşmegi antagonistik liçisid täsirini görkezdi.Galan alty kombinasiýa üçin garaşylýan we syn edilýän ölümiň arasynda düýpli tapawut ýokdy (5-nji tablisa).
Synergistik täsirlere we subletal dozalara esaslanyp, köp sanly Aedes aegypti çybynlaryna garşy olaryň liçisid zäherliligi ahyrynda saýlandy we synagdan geçirildi.Netijeler, eugenol-limonen, dially disulfid-limonen we diallyl disulfid-timfos ikilik kombinasiýalaryny ulanyp, gurçuklaryň ölüminiň 100%, garaşylýan gurçuklaryň ölüminiň degişlilikde 76,48%, 72,16% we 63,4% bolandygyny görkezdi (6-njy tablisa)..Limonen bilen eudesmolyň kombinasiýasy has az täsir edipdir, 24 sagat täsir ediş döwründe 88% liçinkalaryň ölümi hasaba alyndy (6-njy tablisa).Gysgaça aýtsak, saýlanan dört ikilik kombinasiýa, uly göwrümde ulanylanda Aedes aegypti-e garşy sinergistik larwisid täsirini görkezdi (6-njy tablisa).
Uly ýaşly Aedes aegypti-iň uly ilatyna gözegçilik etmek üçin ulular üçin bioassaý üçin üç sany synergistik kombinasiýa saýlandy.Uly mör-möjek koloniýalarynda synag etmek üçin kombinasiýalary saýlamak üçin ilki bilen karwon plus limonen we ewkaliptol we eudesmol ýaly iň oňat iki synergistik terpen kombinasiýasyna ünsi jemledik.Ikinjiden, sintetiki organofosfat malationynyň we terpenoidleriň kombinasiýasyndan iň oňat synergistik kombinasiýa saýlandy.Malathion bilen eudesmolyň kombinasiýasy, iň ýokary gözegçilik edilýän ölüm derejesi we dalaşgärleriň düzüminiň LC50 bahasy sebäpli uly mör-möjek koloniýalarynda synag üçin iň oňat kombinasiýa diýip hasaplaýarys.Malathion α-pinene, diallyl disulfid, ewkalipt, karwon we eudesmol bilen bilelikde sinergizmi görkezýär.Emma LC50 bahalaryna seretsek, Eudesmol iň pes bahasy (2.25 ppm).Malation, α-pinen, dially disulfid, ewkaliptol we karwonyň ​​hasaplanan LC50 bahalary 5,4, 716.55, 166.02, 17.6 we 140,79 ppm.degişlilikdeBu bahalar, malathion bilen eudesmolyň birleşmesiniň doza taýdan iň amatly kombinasiýadygyny görkezýär.Netijeler, karwon we limonen bilen eudesmol we malation kombinasiýalarynyň ölüm derejesiniň 61% -den 65% -e garanyňda 100% bolandygyny görkezdi.Beýleki bir kombinasiýa, eudesmol we ewkaliptol, garaşylýan ölüm derejesi bilen deňeşdirilende 24 sagat täsir edenden soň ölüm derejesini 78,66% görkezdi.Saýlanan üç kombinasiýa, uly ýaşly Aedes aegypti garşy uly göwrümde ulanylanda-da sinergistik täsirleri görkezdi (6-njy tablisa).
Bu gözlegde, Mp, As, Os, Em we Cl ýaly saýlanan ösümlik EO-lary Aedes aegypti-iň gurçuklaryna we ulular basgançaklaryna geljegi uly ölüm täsirini görkezdi.Mp EO LC50 bahasy 0,42 ppm bolan iň ýokary gurçuk işjeňligi boldy, 24 sagatdan soň LC50 bahasy 50 ppm-den az bolan As, Os we Em EOs.Bu netijeler çybynlaryň we beýleki çüýrük çybynlaryň ozalky gözlegleri bilen gabat gelýär10,11,12,13,14.Cl-iň gurçuk güýji beýleki efir ýaglaryndan pes bolsa-da, LC50 bahasy 24 sagatdan soň 163,65 ppm, ulularyň potensialy 24 sagatdan soň LC50 bahasy 23.37 ppm bolan iň ýokarydyr.Mp, As we Em EO-lar 24 sagatda 100-120 ppm aralygynda LC50 bahalary bilen oňat allersid potensialyny görkezdiler, ýöne olaryň liçisid täsirinden has pesdi.Beýleki tarapdan, EO Os iň ýokary bejeriş dozasynda-da ähmiýetsiz allergid täsirini görkezdi.Şeýlelik bilen, netijeler etilen oksidiniň ösümliklere zäherliliginiň çybynlaryň ösüş döwrüne baglylykda üýtgäp biljekdigini görkezýär15.Şeýle hem, EO-laryň mör-möjekleriň bedenine aralaşmagyna, belli bir fermentler bilen täsirine we her ösüş döwründe çybynyň detoksifikasiýa ukybyna baglydyr16.Geçirilen köp sanly gözleg, esasy komponent birleşmesiniň etilen oksidiniň biologiki işjeňliginde möhüm faktordygyny görkezdi, sebäbi umumy birleşmeleriň aglaba bölegini düzýär3,12,17,18.Şonuň üçin her EO-da iki esasy birleşmäni göz öňünde tutduk.GC-MS netijelerine esaslanyp, öňki habarlara laýyk gelýän 19,20,21 EO As-yň esasy birleşmeleri hökmünde diallyl disulfid we diallyl trisulfid kesgitlenildi.Öňki habarlarda mentolyň esasy birleşmeleriniň biridigi görkezilse-de, karwon we limonen ýene-de Mp EO22,23 esasy birleşmeleri hökmünde kesgitlenildi.Os EO-nyň kompozisiýa profilinde eugenol bilen metil eugenolyň esasy birleşmelerdigini görkezdi, bu bolsa öňki gözlegçileriň netijelerine meňzeýär16,24.Ewkaliptol we ewkalipt, Em ýapragynyň ýagynda bar bolan esasy birleşmeler hökmünde habar berildi, bu käbir gözlegçileriň tapyşlaryna laýyk gelýär 25,26, ýöne Olalade we başgalaryň netijelerine ters gelýär.27.Sineolyň we α-pineniň agdyklyk etmegi, öňki gözleglere meňzeş melaleuca efir ýagynda hasaba alyndy28,29.Şol bir ösümlik görnüşinden dürli ýerlerde alynýan efir ýaglarynyň düzümindäki we konsentrasiýasyndaky kesgitli tapawutlar habar berildi we geografiki ösümlikleriň ösüş şertlerine, hasyl wagtyna, ösüş döwrüne ýa-da ösümlik ýaşyna täsir edýän bu işde syn edildi.himotipleriň peýda bolmagy we ş.m. 22,30,31,32.Soňra kesgitlenen esasy birleşmeler, ulularyň Aedes aegypti çybynlaryna edýän täsiri we täsiri üçin satyn alyndy we synag edildi.Netijeler, diallyl disulfidiň gurçuk işjeňliginiň çig EO As bilen deňeşdirilendigini görkezdi.Emma dially trisulfidiň işjeňligi EO As-dan has ýokary.Bu netijeler Kimbaris we başgalaryň alan netijelerine meňzeýär.“Culex” filippinlerinde.Şeýle-de bolsa, bu iki birleşme, Tenebrio molitorynda Plata-Rueda we 34-iň netijelerine laýyk gelýän çybynlara garşy gowy awtokisid işjeňligini görkezmedi.Os EO, Aedes aegypti-iň gurçuk basgançagyna garşy täsirli, ýöne ulularyň basgançagyna garşy däl.Esasy aýry birleşmeleriň liçinkalar işjeňliginiň çig Os EO-dan pesdigi kesgitlenildi.Bu, beýleki birleşmeler we olaryň çig etilen oksidindäki täsirleri üçin rol oýnaýar.Diňe metil eugenolyň ähmiýetsiz işjeňligi bar, diňe eugenolyň ortaça liçinkalar işjeňligi bar.Bu netije, bir tarapdan, 35,36, beýleki tarapdan bolsa öňki gözlegçileriň netijelerine ters gelýär 37,38.Eugenolyň we metileugenolyň funksional toparlaryndaky tapawutlar, bir maksatly mör-möjeklere dürli zäherlenmelere sebäp bolup biler39.Limoneniň ortaça liçinkalar işjeňligi bar, karwonyň ​​täsiri ujypsyzdy.Şonuň ýaly-da, limoneniň uly mör-möjeklere az zäherliligi we karwonyň ​​ýokary zäherliligi käbir öňki gözlegleriň netijelerini goldaýar40, ýöne beýlekilerine ters gelýär41.Intrasiklik we ekzosiklik pozisiýalarynda goşa baglanyşyklaryň bolmagy, bu birleşmeleriň larvisidler ýaly peýdasyny artdyryp biler3,41, doýmadyk alfa we beta uglerodly keton bolan karwon ulularda zäherlenmek üçin has ýokary potensialy görkezip biler42.Şeýle-de bolsa, limoneniň we karwonyň ​​aýratyn aýratynlyklary umumy EO Mp-den has pesdir (1-nji tablisa, 3-nji tablisa).Synag edilen terpenoidleriň arasynda eudesmol, LC50 bahasy 2,5 ppm-den pes bolan iň uly larwisid we ulular işjeňliginiň bardygyny ýüze çykardy we bu Aedes çybynlaryna gözegçilik etmek üçin geljegi uly birleşme boldy.Onuň öndürijiligi, ähli EO Em-den has gowudyr, ýöne bu Çeng we başgalaryň netijelerine laýyk gelmeýär.Eudesmol, ewkalipt ýaly kislorodly monoterpenlerden az üýtgäp durýan we şonuň üçin pestisid hökmünde has uly potensiala eýe bolan iki izopren birligi bolan seskiterpen.Ewkaliptolyň özi, larwisid işjeňliginden has uludyr we ozalky gözlegleriň netijesi muny goldaýar we ret edýär37,43,44.Diňe işjeňlik tutuş EO Cl bilen deňeşdirilýär.Anotherene bir welosiped monoterpeni, α-pinen, ulularyň täsiri Aedes aegypti-de, doly EO Cl-iň täsiriniň tersi bolan larwisid täsirinden has az täsir edýär.Terpenoidleriň umumy insektisid işjeňligi, olaryň lipofilizligine, üýtgemegine, uglerodyň şahasyna, proýeksiýa meýdanyna, ýerüsti meýdanyna, işleýiş toparlaryna we pozisiýalaryna täsir edýär45,46.Bu birleşmeler öýjükleriň ýygnanmagyny ýok etmek, dem alyş işjeňligini bökdemek, nerw impulslarynyň geçmegine päsgel bermek we ş.m. hereket edip biler. 47 Sintetik organofosfat Temephos, Lekiň maglumatlaryna laýyk gelýän LC50 bahasy 0,43 ppm bolan iň ýokary larwisid işjeňligine eýe boldy - Utala48.Sintetiki organofosfor malationynyň ulularyň işjeňligi 5.44 ppm-de habar berildi.Bu iki organofosfat “Aedes aegypti” -niň laboratoriýa ştamlaryna garşy oňaýly jogap görkezendigine garamazdan, dünýäniň dürli künjeklerinde çybynlara garşylygy habar berildi49.Şeýle-de bolsa, ösümlik dermanlaryna garşylygyň ösüşi barada şuňa meňzeş habar tapylmady50.Şeýlelik bilen, botanika serişdeleri wektor gözegçilik programmalarynda himiki pestisidlere potensial alternatiwalar hasaplanýar.
Liçinkalaryň täsiri timetfosly güýçli terpenoidlerden we terpenoidlerden taýýarlanan 28 ikilik kombinasiýasynda (1: 1) synag edildi we 9 kombinasiýanyň sinergistik, 14 antagonistik we 5 garşydaşdygy anyklandy.Täsir ýok.Beýleki tarapdan, ulularyň kuwwatly bioassaýynda 7 kombinasiýanyň sinergistik, 15 kombinasiýanyň garşydygy we 6 kombinasiýanyň hiç hili täsiriniň ýokdugy habar berildi.Käbir kombinasiýalaryň sinergistik täsiriniň döremeginiň sebäbi, dalaşgär birleşmeleriniň dürli möhüm ýollarda bir wagtda täsirleşmegi ýa-da belli bir biologiki ýoluň dürli fermentleriniň yzygiderli gadagan edilmegi sebäpli bolup biler51.Limoneniň dially disulfid, ewkalipt ýa-da eugenol bilen birleşmeginiň kiçi we uly göwrümli goşundylarda sinergistik bolandygy ýüze çykaryldy (6-njy tablisa), ewkalipt ýa-da pin-pinen bilen utgaşmagy bolsa liçinkalara garşy täsir edýär.Orta hasap bilen limonen, gowy metil toparlarynyň bolmagy, gatlak korneýasyna gowy aralaşmagy we başga bir hereket mehanizmi sebäpli gowy synergist bolup görünýär.Limoneniň mör-möjek kesikullaryna (kontakt zäherliligi), iýmit siňdiriş ulgamyna (antifeedant) täsir etmegi ýa-da dem alyş ulgamyna täsir etmegi bilen zäherli täsirleri döredip biljekdigi öň habar berilýär, 54 bolsa eugenol ýaly fenilpropanoidler metabolik fermentlere 55 täsir edip biler. Şonuň üçin birleşmeleriň dürli hereket mehanizmleri bilen birleşmegi, garyndynyň umumy öldüriji täsirini artdyryp biler.Ewkaliptiň dially disulfid, ewkalipt ýa-da pin-pinen bilen sinergistikdigi anyklandy, ýöne beýleki birleşmeler bilen beýleki kombinasiýalar ýa-da larisid däl ýa-da antagonistikdi.Irki gözlegler, ewkaliptolyň asetilkolinesterazda (AChE), şeýle hem oktaamin we GABA reseptorlarynda inhibitor işjeňliginiň bardygyny görkezdi.Siklik monoterpenler, ewkaliptol, eugenol we ş.m. neýrotoksiki işjeňligi ýaly hereket mehanizmine eýe bolup bilýändigi sebäpli, 57 şeýlelik bilen özara päsgelçilik arkaly birleşdirilen täsirlerini azaldar.Edil şonuň ýaly-da, Temephosyň dially disulfid, α-pinen we limonen bilen birleşmeginiň ösümlik önümleri bilen sintetiki organofosfatlaryň arasynda sinergistik täsiriň bardygy baradaky öňki habarlary goldaýan sinergistik tapyldy.
Eudesmol bilen ewkaliptolyň birleşmegi, “Aedes aegypti” -niň gurçuklaryna we ulular tapgyryna sinergistik täsir edýändigi, dürli himiki gurluşlary sebäpli dürli hereket usullary sebäpli bolmagy ähtimal.Eudesmol (sesquiterpene) dem alyş ulgamyna 59 täsir edip biler we ewkaliptol (monoterpen) asetilkolinesteraza 60 täsir edip biler.Goşundylaryň iki ýa-da has köp maksatly ýerlere bilelikde täsir etmegi, kombinasiýanyň umumy öldüriji täsirini ýokarlandyryp biler.Uly ýaşly maddalaryň bioassaýlarynda malationyň karwon ýa-da ewkaliptol ýa-da ewkaliptol ýa-da dially disulfid ýa-da pin-pinen bilen sinergistikdigi ýüze çykaryldy, bu limoneniň we di goşulmagy bilen sinergistikdigini görkezýär.Allil trisulfidden başga, terpen birleşmeleriniň ähli portfeline gowy synergistik allerkid dalaşgärleri.Thangam we Kathiresan61, malationyň ösümlik ekstraktlary bilen sinergistik täsiriniň şuňa meňzeş netijelerini habar berdiler.Bu sinergistik jogap, malathionyň we fitokimiki serişdeleriň mör-möjek detoksifikasiýa fermentlerine bolan zäherli täsiri sebäpli bolup biler.Malathion ýaly organofosfatlar, adatça sitokrom P450 esterazalaryny we monooksigenazlary 62,63,64 saklamak bilen hereket edýärler.Şonuň üçin malathiony bu hereket mehanizmleri we terpenleri dürli hereket mehanizmleri bilen birleşdirmek, çybynlara umumy öldüriji täsirini güýçlendirip biler.
Başga bir tarapdan, garşydaşlyk, saýlanan birleşmeleriň diňe bir birleşmä garanyňda az işjeňdigini görkezýär.Käbir kombinasiýalarda garşydaşlygyň sebäbi, bir birleşmäniň siňdiriş, paýlanyş, alyş-çalyş ýa-da çykaryş tizligini üýtgetmek arkaly beýleki birleşmäniň özüni alyp barşyny üýtgetmegi bolup biler.Irki gözlegçiler muny neşe kombinasiýalarynda garşydaşlygyň sebäbi hasaplaýardylar.Molekulalar Mümkin bolan mehanizm 65. Şonuň ýaly-da, garşy çykmagyň sebäpleri şuňa meňzeş hereket mehanizmleri, şol bir reseptor ýa-da maksatly ýer üçin düzüm birleşmeleriniň bäsleşigi bilen baglanyşykly bolup biler.Käbir ýagdaýlarda maksatly belogyň bäsdeşliksiz gadaganlygy hem bolup biler.Bu gözlegde, diallyl disulfid we diallyl trisulfid atly iki organosulfur birleşmesi antagonistik täsirleri görkezdi, belki şol bir maksatly ýer üçin bäsdeşlik sebäpli.Edil şonuň ýaly-da, bu iki kükürt birleşmesi antagonistik täsirleri görkezdi we eudesmol we α-pinene bilen birleşdirilende hiç hili täsir etmedi.Eudesmol we alfa-pinen tebigatda siklikdir, diallyl disulfid we diallyl trisulfid tebigatda alifatiki.Himiki gurluşa esaslanyp, bu birleşmeleriň kombinasiýasy umumy öldüriji işjeňligi ýokarlandyrmalydyr, sebäbi niýetlenen ýerleri adatça 34,47 bolýar, ýöne eksperimental ýagdaýda garşydaşlygy tapdyk, bu birleşmeleriň wivo-de käbir näbelli organizmlerdäki roly sebäpli bolup biler.özara täsiriň netijesinde ulgamlardyr.Şonuň ýaly-da, sineol bilen α-pineniň kombinasiýasy antagonistik jogaplary döretdi, ýöne öň gözlegçiler bu iki birleşmäniň dürli hereket maksatlarynyň bardygyny habar berdiler 47,60.Iki birleşme hem siklik monoterpenler bolansoň, öwrenilen kombinator jübütleriniň umumy zäherliligine täsir etmek we täsir etmek üçin bäsleşip biljek käbir umumy maksatly ýerler bolup biler.
LC50 bahalaryna we syn edilen ölüme esaslanyp, iň oňat iki synergistik terpen kombinasiýasy saýlandy, ýagny jübüt karwon + limonen we ewkaliptol + eudesmol, şeýle hem terpenler bilen sintetik organofosfor malathiony.Malathion + Eudesmol birleşmeleriniň optimal sinergistik utgaşmasy ulularyň insektisid bioassaýynda synag edildi.Uly täsirli mör-möjek koloniýalaryny nyşana alyň, bu täsirli kombinasiýalar has uly täsir ediş ýerlerinde köp sanly adama garşy işläp biler.Bu kombinasiýalaryň hemmesi uly mör-möjeklere garşy sinergistik täsirini görkezýär.Şuňa meňzeş netijeler, Aedes aegypti liçinkalarynyň köp ilatyna garşy synag edilen optimal sinergistik liçisid kombinasiýasy üçin alyndy.Şeýlelik bilen, ösümlik EO birleşmeleriniň täsirli sinergistik larvisid we ulularisid kombinasiýasynyň bar bolan sintetiki himiki maddalara garşy güýçli kandidatdygyny we mundan başga-da Aedes aegypti ilatyna gözegçilik etmek üçin ulanylyp bilinjekdigini aýdyp bolar.Şonuň ýaly-da, çybynlara berilýän timetfosyň ýa-da malationyň dozalaryny azaltmak üçin sintetiki liçinkalaryň ýa-da ulularidleriň terpenler bilen täsirli kombinasiýalary ulanylyp bilner.Bu güýçli synergistik kombinasiýalar, Aedes çybynlarynda neşe garşylygynyň ewolýusiýasy boýunça geljekki gözlegler üçin çözgütler berip biler.
Aedes aegypti-iň ýumurtgalary, Hindi lukmançylyk gözleg geňeşiniň Dibrugarh sebit lukmançylyk gözleg merkezinden ýygnalyp, Gauhati uniwersitetiniň zoologiýa bölüminde gözegçilik edilýän temperaturada (28 ± 1 ° C) we çyglylykda (85 ± 5%) saklandy. aşakdaky şertler: Arivoli we ş.m. beýan edildi.Liçinkalar çykandan soň liçinkalara iýmit (it biskwiti tozy we 3: 1 nisbatynda hamyrmaýa) we ululara 10% glýukoza ergini berildi.Döredilenden 3-nji günden başlap, uly ýaşly aýal çybynlara albino alakalarynyň ganyny sormaga rugsat berildi.Süzgüç kagyzy stakana suwa batyryň we ýumurtga goýýan kapasa salyň.
Ewkalipt ýapraklary (Myrtaceae), mukaddes reyhan (Lamiaceae), nan (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) we allium lampalary (Amaryllidaceae) saýlanan ösümlik nusgalary.Guwahati-den ýygnalyp, Gauhati uniwersitetiniň Botanika bölümi tarapyndan kesgitlenildi.Collectedygnalan ösümlik nusgalary (500 g) 6 sagatlap Kliwenjer enjamyny ulanyp gidrodistilizasiýa edildi.Çykarylan EO arassa aýna flakonlarda ýygnalyp, has giňişleýin öwrenmek üçin 4 ° C derejesinde saklandy.
Larwisid zäherliligi Bütindünýä Saglyk Guramasynyň 67 üýtgedilen standartlary ulanylyp öwrenildi.DMSO emulsifikator hökmünde ulanyň.Her EO konsentrasiýasy ilkibaşda 100 we 1000 ppm-da synag edildi we her nusgada 20 sany liçinka ýüze çykdy.Netijelere görä, konsentrasiýa diapazony ulanyldy we ölüm 1 sagatdan 6 sagada (1 sagat aralykda), bejergiden 24 sagat 48 sagat 72 sagat soň hasaba alyndy.Subletal konsentrasiýalary (LC50) 24, 48 we 72 sagat täsir edenden soň kesgitlenildi.Her bir konsentrasiýa bir negatiw gözegçilik (diňe suw) we bir polo positiveitel gözegçilik (DMSO bilen arassalanan suw) bilen birlikde üçlüge bölünipdi.Eger gurjak ýüze çyksa we gözegçilik toparynyň liçinkalarynyň 10% -den gowragy ölse, synag gaýtalanýar.Gözegçilik toparyndaky ölüm derejesi 5-10% arasynda bolsa, Abbott düzediş formulasyny 68 ulanyň.
Ramar we başganyň beýan eden usuly.69 ululary asetony ergin hökmünde ulanyp, Aedes aegypti-e garşy bioassay üçin ulanyldy.Her EO başda 100 we 1000 ppm konsentrasiýalarynda ulular Aedes aegypti çybynlaryna garşy synag edildi.“Whatman” belgisine her taýýarlanan ergini 2 ml çalyň.1 bölek süzgüç kagyzy (ululygy 12 x 15 sm2) we asetonyň 10 minut bugarmagyna ýol beriň.Dolandyryş hökmünde bary-ýogy 2 ml aseton bilen bejerilen süzgüç kagyzy ulanyldy.Aseton bugarandan soň, arassalanan süzgüç kagyzy we dolandyryş süzgüç kagyzy silindr turbasyna (10 sm çuňlukda) ýerleşdirilýär.3-den 4 günlük gana iýmitlenmeýän çybynlar her konsentrasiýanyň üçlügine geçirildi.Deslapky synaglaryň netijelerine görä, saýlanan ýaglaryň dürli konsentrasiýalary synag edildi.Ölüm 1 sagat, 2 sagat, 3 sagat, 4 sagat, 5 sagat, 6 sagat, 24 sagat, 48 sagat we çybyn boşadylandan 72 sagat soň hasaba alyndy.24 sagat, 48 sagat we 72 sagat täsir etmek üçin LC50 bahalaryny hasaplaň.Dolandyryş nokadynyň ölüm derejesi 20% -den ýokary bolsa, ähli synagy gaýtalaň.Edil şonuň ýaly-da, gözegçilik toparyndaky ölüm derejesi 5% -den ýokary bolsa, Abbottyň formula68 ulanyp, bejerilen nusgalaryň netijelerini sazlaň.
Saýlanan efir ýaglarynyň düzüm birleşmelerini seljermek üçin gaz hromatografiýasy (Agilent 7890A) we köpçülik spektrometri (Accu TOF GCv, Jeol) geçirildi.GC FID detektory we kapilýar sütüni (HP5-MS) bilen enjamlaşdyryldy.Daşaýjy gaz geliýdi, akym tizligi 1 ml / min.GC programmasy Allium sativumy 10: 80-1M-8-220-5M-8-270-9M we Ocimum Sainttum 10: 80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 - 280, nan 10: 80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, ewkalipt 20.60-1M-10-200-3M-30-280, gyzyl reňk üçin müň gatlak üçin olar 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Her EO-nyň esasy birleşmeleri, GC hromatogrammasyndan we köpçülikleýin spektrometriýa netijelerinden hasaplanan meýdanyň göterimine baglylykda kesgitlenildi (NIST 70 standartlar bazasyna salgylanýar).
Her EO-daky iki esasy birleşme GC-MS netijelerine esaslanyp saýlandy we bio-barlaglar üçin Sigma-Aldrihden 98–99% arassalygynda satyn alyndy.Birleşmeler, ýokarda görkezilişi ýaly Aedes aegypti-e garşy ulularyň we ulularyň netijeliligi üçin synag edildi.Iň köp ulanylýan sintetik larwisidler tamefosat (Sigma Aldrih) we ulularyň neşe malathiony (Sigma Aldrih) şol bir prosedura eýerip, saýlanan EO birleşmeleri bilen täsirini deňeşdirmek üçin derňeldi.
Saýlanan terpen birleşmeleriniň we terpen birleşmeleriniň ikili garyndylary we täjirçilik organofosfatlar (tilephos we malathion) her dalaşgär birleşmesiniň LC50 dozasyny 1: 1 nisbatynda garyşdyrmak arkaly taýýarlandy.Taýýarlanan kombinasiýalar, ýokarda görkezilişi ýaly Aedes aegypti-iň gurçuk we ulular tapgyrlarynda synag edildi.Her bioassaý her kombinasiýa üçin üç nusgada we her kombinasiýada bar bolan aýratyn birleşmeler üçin üç nusgada ýerine ýetirildi.Maksatly mör-möjekleriň ölümi 24 sagatdan soň hasaba alyndy.Aşakdaky formulany ulanyp, ikilik garyndy üçin garaşylýan ölüm derejesini hasaplaň.
bu ýerde E = ikilik kombinasiýa, ýagny baglanyşyk (A + B) jogap hökmünde Aedes aegypti çybynlarynyň ölüm derejesi garaşylýar.
Her ikilik garyndynyň täsiri sinergistik, antagonistik ýa-da Pavla52 tarapyndan beýan edilen usul bilen hasaplanan χ2 bahasyna esaslanmadyk täsir edildi.Aşakdaky formulany ulanyp, her kombinasiýa üçin χ2 bahasyny hasaplaň.
Kombinasiýanyň täsiri, hasaplanan χ2 bahasy degişli erkinlik derejeleri (95% ynam aralygy) üçin tablisanyň bahasyndan ýokary bolanda we syn edilen ölümiň garaşylýan ölümden ýokarydygy ýüze çykarylanda sinergistik hökmünde kesgitlenildi.Edil şonuň ýaly-da, islendik kombinasiýa üçin hasaplanan χ2 bahasy, belli bir derejede erkinlik bilen tablisanyň bahasyndan ýokary bolsa, ýöne syn edilýän ölüm garaşylýan ölümden pes bolsa, bejergi garşylykly hasaplanýar.Islendik kombinasiýada χ2-iň hasaplanan bahasy degişli erkinlik derejelerinde tablisanyň bahasyndan pes bolsa, bu kombinasiýa hiç hili täsir etmeýär.
Mümkin bolan mör-möjeklere garşy synag üçin üç-dört potensial sinergistik kombinasiýa (100 liçinkalar we 50 sany liçisid we ulularyň mör-möjek işjeňligi) saýlandy.Ulular) ýokardaky ýaly dowam edýärler.Garyndylar bilen birlikde, saýlanan garyndylarda bar bolan aýratyn birleşmeler, deň mukdarda Aedes aegypti liçinkalary we ulular üçin synag edildi.Kombinasiýa gatnaşygy, bir kandidat birleşmesiniň LC50 dozasy, beýleki düzüm birleşmesiniň LC50 dozasy.Uly ýaşlylaryň bioassaýynda saýlanan birleşmeler erginli asetonda eräp, 1300 sm3 silindr plastmassa gap bilen örtülen süzgüç kagyzyna ulanyldy.Aseton 10 minut bugardy we ulular boşadyldy.Şonuň ýaly-da, liçinkalar bioassaýynda LC50 kandidat birleşmeleriniň dozalary ilki deň mukdarda DMSO-da eritildi we 1300 cc plastik gaplarda saklanýan 1 litr suw bilen garyldy we liçinkalar goýberildi.
LC50 bahalaryny hasaplamak üçin SPSS (16 wersiýa) we Minitab programma üpjünçiligi arkaly hasaba alnan 71 ölüm maglumatlarynyň ähtimal derňewi geçirildi.


Iş wagty: Iýul-01-2024