Nature.com saýtyna gireniňiz üçin sag boluň. Ulanýan brauzeriňiziň wersiýasynda CSS goldawy çäkli. Iň gowy netijeler üçin brauzeriňiziň täze wersiýasyny ulanmagyňyzy maslahat berýäris (ýa-da Internet Explorer-de Gatnaşyklyk Režimini öçüriň). Şol bir wagtyň özünde, yzygiderli goldawy üpjün etmek üçin saýty stilizasiýasyz ýa-da JavaScript-siz görkezýäris.
Ösümlikden alynýan insektisid birleşmeleriniň utgaşmalary zyýankeşlere garşy sinergetik ýa-da antagonistik özara täsirleri görkezip biler. Aedes çybynlarynyň geçirýän keselleriniň çalt ýaýramagy we Aedes çybynlarynyň däp bolan insektisidlere garşylyklylygynyň artmagy göz öňünde tutulanda, ösümlik efir ýaglaryna esaslanýan terpen birleşmeleriniň ýigrimi sekiz utgaşmasy düzüldi we Aedes aegypti-niň liçinka we ulular üçin netijeliligi üçin synagdan geçirildi. Ilki bilen bäş ösümlik efir ýaglary (EO) liçinka we ulular üçin netijeliligi üçin bahalandyryldy we her EO-da GC-MS netijelerine esaslanyp iki esasy birleşme anyklandy. Esasy anyklanan birleşmeler, ýagny diallil disulfid, diallil trisulfid, karwone, limonen, ewgenol, metil ewgenol, ewkaliptol, ewdesmol we çybyn alfa-pinen satyn alyndy. Soňra bu birleşmeleriň ikili utgaşmalary subletal dozalar ulanylyp taýýarlanyldy we olaryň sinergetik we antagonistik täsirleri synagdan geçirildi we kesgitlenildi. Iň gowy liçinka garşy düzümler limoneni dialil disulfid bilen garyşdyrmak arkaly, iň gowy ululara garşy düzümler bolsa karwony limonen bilen garyşdyrmak arkaly alynýar. Söwda maksatly ulanylýan sintetiki liçinka garşy Temphos we ululara niýetlenen Malathion dermany aýratynlykda we terpenoidler bilen ikilik kombinasiýalarda synagdan geçirildi. Netijeler temefos bilen dialil disulfidiň, malathion bilen eudesmolyň kombinasiýasynyň iň täsirli kombinasiýa bolandygyny görkezdi. Bu güýçli kombinasiýalar Aedes aegypti-e garşy ulanmak üçin mümkinçilige eýedir.
Ösümlik efir ýaglary (ÖEÝ) dürli bioaktiw birleşmeleri öz içine alýan ikinji metabolitlerdir we sintetiki pestisidlere alternatiwa hökmünde barha möhümleşýär. Olar diňe bir ekologiýa taýdan arassa we ulanmak üçin amatly bolmak bilen çäklenmän, eýsem dürli bioaktiw birleşmeleriň garyndysydyr, bu bolsa dermanlara garşylyklylygyň döremeginiň ähtimallygyny hem azaldýar1. GC-MS tehnologiýasyny ulanyp, barlagçylar dürli ösümlik efir ýaglarynyň düzüm böleklerini barladylar we 17,500 aromatik ösümlikden 3000-den gowrak birleşmeleri anykladylar2, olaryň köpüsiniň insektisid häsiýetleri synagdan geçirildi we insektisid täsirleriniň bardygy habar berilýär3,4. Käbir barlaglar birleşmäniň esasy komponentiniň zäherliliginiň onuň çig etilen oksidi bilen birmeňzeş ýa-da ondan ýokarydygyny nygtaýar. Emma aýratyn birleşmeleriň ulanylmagy, himiki insektisidlerde bolşy ýaly, garşylygyň ösmegi üçin ýene-de mümkinçilik döredip biler5,6. Şonuň üçin häzirki wagtda üns insektisid täsirini ýokarlandyrmak we maksatly zyýankeşler populýasiýalarynda garşylyklylygyň ähtimallygyny azaltmak üçin etilen oksidi esasyndaky birleşmeleriň garyndylaryny taýýarlamaga gönükdirilendir. EO-larda bar bolan aýry-aýry işjeň birleşmeler EO-nyň umumy işjeňligini görkezýän kombinasiýalarda sinergetik ýa-da antagonistik täsirleri görkezip biler, bu bolsa öňki barlagçylar tarapyndan geçirilen barlaglarda gowy nygtaldy7,8. Wektorlaryň gözegçiligi maksatnamasyna EO we onuň komponentleri hem girýär. Efir ýaglarynyň çybyn-çivileriň garşysyna täsiri Culex we Anopheles çybyn-çivilerinde giňden öwrenildi. Birnäçe barlaglar umumy zäherliligi ýokarlandyrmak we goşmaça täsirleri azaltmak üçin dürli ösümlikleri täjirçilik maksatly ulanylýan sintetiki pestisidler bilen utgaşdyrmak arkaly netijeli pestisidleri işläp düzmäge synanyşdy9. Emma şeýle birleşmeleriň Aedes aegypti-e garşy barlaglary seýrek bolmagynda galýar. Lukmançylyk ylmyndaky ösüşler we dermanlaryň we waksinalaryň işlenip düzülmegi käbir wektorlar arkaly geçýän kesellere garşy göreşmäge kömek etdi. Emma Aedes aegypti çybyn-çivileri tarapyndan geçirilýän wirusyň dürli serotipleriniň bolmagy sanjym maksatnamalarynyň şowsuzlygyna getirdi. Şonuň üçin şeýle keseller ýüze çykanda, wektorlaryň gözegçiligi maksatnamalary keseliň ýaýramagynyň öňüni almagyň ýeke-täk mümkinçiligi bolup durýar. Häzirki ýagdaýda, Aedes aegypti-niň gözegçiligi örän möhümdir, sebäbi ol dürli wiruslaryň we olaryň serotipleriniň esasy wektory bolup, dengue gyzdyrmasyny, Zika, dengue gemorragik gyzdyrmasyny, sary gyzdyrmany we ş.m. döredýär. Iň üns çekiji zat, wektor arkaly geçýän Aedes keselleriniň ähli ýagdaýlarynyň Müsürde we dünýäde her ýyl artýandygydyr. Şonuň üçin, şuňa baglylykda, Aedes aegypti populýasiýalary üçin ekologiýa taýdan arassa we netijeli gözegçilik çärelerini işläp düzmek üçin gyssagly zerurlyk bar. Bu babatda mümkin bolan dalaşgärler EO-lar, olaryň düzüm birleşmeleri we olaryň kombinasiýalarydyr. Şonuň üçin bu gözlegde Aedes aegypti-e garşy insektisid häsiýetlerine eýe bolan bäş ösümlikden (ýagny ýalpyz, mukaddes reýhan, ewkalipt tegmilli, allium kükürt we melaleuka) esasy ösümlik EO birleşmeleriniň netijeli sinergetik kombinasiýalaryny anyklamaga synanyşyldy.
Saýlanan ähli EO-lar 24 sagatlyk LC50 0,42-den 163,65 ppm-e çenli aralykda Aedes aegypti-e garşy potensial liçinki öldüriji işjeňligi görkezdi. Iň ýokary liçinki öldüriji işjeňlik 24 sagatda LC50 gymmaty 0,42 ppm bolan ýalpyz (Mp) EO-da, ondan soň 24 sagatda LC50 gymmaty 16,19 ppm bolan sarymsakda (As) hasaba alyndy (1-nji tablisa).
Ocimum Sainttum, Os EO-dan başga, barlanan beýleki dört EO-nyň hemmesi 24 sagatlyk täsir döwründe LC50 gymmatlyklary 23,37-den 120,16 ppm-e çenli bolup, açyk allergiki täsirleri görkezdi. Thymophilus striata (Cl) EO täsir edilenden soň 24 sagadyň dowamynda LC50 gymmaty 23,37 ppm bolan ululary öldürmekde iň netijeli boldy, ondan soň LC50 gymmaty 101,91 ppm bolan Eucalyptus maculata (Em) geldi (1-nji tablisa). Beýleki tarapdan, Os üçin LC50 gymmaty heniz kesgitlenmedi, sebäbi iň ýokary dozada ölüm derejesi 53% boldy (Goşmaça surat 3).
Her bir EO-daky iki esasy düzüm birleşmesi NIST kitaphana maglumat bazasynyň netijelerine, GC hromatogrammasynyň meýdan prosentine we MS spektrleriniň netijelerine esaslanyp kesgitlenildi we saýlandy (2-nji tablisa). EO As üçin, kesgitlenen esasy birleşmeler diallil disulfid we diallil trisulfid boldy; EO Mp üçin kesgitlenen esasy birleşmeler karvon we limonen, EO Em üçin kesgitlenen esasy birleşmeler eudesmol we ewkaliptol boldy; EO Os üçin kesgitlenen esasy birleşmeler eugenol we metil eugenol, EO Cl üçin bolsa kesgitlenen esasy birleşmeler eugenol we α-pinen boldy (1-nji surat, Goşmaça suratlar 5–8, Goşmaça tablisa 1–5).
Saýlanan efir ýaglarynyň esasy terpenoidleriniň massa spektrometriýasynyň netijeleri (A-diallil disulfid; B-diallil trisulfid; C-ewgenol; D-metil ewgenol; E-limonen; F-aromatik seperon; G-α-pinen; H-sineol; R-eudamol).
Jemi dokuz birleşme (diallil disulfid, diallil trisulfid, eugenol, metil eugenol, karvon, limonen, ewkaliptol, eudesmol, α-pinen) EO-nyň esasy bölekleri bolan netijeli birleşmeler hökmünde kesgitlenildi we liçinka tapgyrlarynda Aedes aegypti-e garşy aýratynlykda biosynag geçirildi. Eudesmol birleşmesi 24 sagat täsir edilenden soň 2,25 ppm LC50 gymmaty bilen iň ýokary liçinka garşy işjeňlige eýe boldy. Diallil disulfid we diallil trisulfid birleşmeleriniň hem potensial liçinka garşy täsirleri bardygy, ortaça subletal dozalaryň 10-20 ppm aralygynda bolandygy anyklandy. Eugenol, limonen we ewkaliptol birleşmeleri üçin LC50 gymmatlyklary 63,35 ppm, 139,29 ppm bolan ortaça liçinka garşy işjeňlik ýene-de syn edildi. we 24 sagatdan soň degişlilikde 181.33 ppm (3-nji tablisa). Şeýle-de bolsa, metil ewgenolyň we karwonyň iň ýokary dozalarda hem larwisid mümkinçiligi tapylmady, şonuň üçin LC50 gymmatlyklary hasaplanmady (3-nji tablisa). Temephos sintetiki larwisidiniň 24 sagatlyk täsirde Aedes aegypti-e garşy ortaça ölüm howply konsentrasiýasy 0.43 ppm boldy (3-nji tablisa, Goşmaça 6-njy tablisa).
Ýedi birleşme (diallil disulfid, diallil trisulfid, ewkaliptol, α-pinen, eudesmol, limonen we karvon) netijeli EO-nyň esasy birleşmeleri hökmünde kesgitlenildi we uly ýaşly Müsür Aedes çybynlaryna garşy aýratynlykda synagdan geçirildi. Probit regressiýa analizine görä, Eudesmolyň LC50 gymmaty 1,82 ppm bolan iň ýokary potensiala eýedigi, ondan soň 24 sagatlyk täsir wagtynda LC50 gymmaty 17,60 ppm bolan Eucalyptol geldi. Synagdan geçirilen galan bäş birleşme LC50-leri 140,79-dan 737,01 ppm-e çenli bolan ulular üçin ortaça zyýanlydy (3-nji tablisa). Sintetiki organofosfor malationy eudesmoldan has az güýçli we beýleki alty birleşmeden ýokarydy, 24 sagatlyk täsir döwründe LC50 gymmaty 5,44 ppm boldy (3-nji tablisa, Goşmaça 6-njy tablisa).
LC50 dozalarynyň ikilik kombinasiýalaryny 1:1 gatnaşykda düzmek üçin ýedi güýçli gurşun birleşmesi we organofosfor tamefosaty saýlanyldy. Jemi 28 ikilik kombinasiýa taýýarlanyldy we olaryň Aedes aegypti-e garşy larwisid täsirliligi synagdan geçirildi. Dokuz kombinasiýa sinergetik, 14 kombinasiýa antagonistik we bäş kombinasiýa larwisid täsirli däldigi anyklandy. Sinergik kombinasiýalaryň arasynda dialil disulfid we temofol kombinasiýalary iň täsirli bolup, 24 sagatdan soň 100% ölüm hadysasy hasaba alyndy (4-nji tablisa). Şonuň ýaly-da, limonen bilen dialil disulfid we eugenol bilen timetfos garyndylary gowy potensial görkezdi we larwisid ölüm hadysasy 98,3% boldy (5-nji tablisa). Galan 4 kombinasiýa, ýagny eudesmol plus ewkaliptol, eudesmol plus limonen, ewkaliptol plus alfa-pinen, alfa-pinen plus temefos, hem uly larwisid täsirini görkezdi, ölüm derejesi 90% -den geçdi. Garaşylýan ölüm derejesi 60-75% -e golaýdyr (4-nji tablisa). Şeýle-de bolsa, limoneniň α-pinen ýa-da ewkalipt bilen utgaşmasy antagonistik reaksiýalary görkezdi. Şeýle hem, Temefosyň eugenol ýa-da ewkalipt ýa-da eudesmol ýa-da diallil trisulfid bilen garyndylarynyň antagonistik täsirleri bardygy anyklandy. Şeýle hem, diallil disulfid we diallil trisulfid we bu birleşmeleriň haýsysynyň bolsa biriniň eudesmol ýa-da eugenol bilen utgaşmasy larwisid täsirinde antagonistikdir. Eudesmolyň eugenol ýa-da α-pinen bilen utgaşmasy bilen antagonizm barada hem habar berildi.
Uly ýaşlylaryň kislotaly işjeňligi üçin synagdan geçirilen ähli 28 binar garyndynyň 7-si sinergetik, 6-sy täsir etmedi we 15-si antagonistik boldy. Eudesmolyň ewkalipt bilen we limoneneniň karvon bilen garyndylary beýleki sinergetik kombinasiýalardan has täsirli bolup, ölüm derejesi 24 sagatda degişlilikde 76% we 100% boldy (5-nji tablisa). Malatiýon limonen we diallil trisulfidden başga ähli birleşmeler bilen sinergetik täsir görkezýändigi syn edildi. Beýleki tarapdan, diallil disulfid bilen diallil trisulfid bilen olaryň haýsysynyň bolsa ewkalipt, ýa-da ewkaliptol, ýa-da karvon ýa-da limonen bilen birleşmesiniň arasynda antagonizm tapyldy. Şonuň ýaly-da, α-pineniň eudesmol ýa-da limonen bilen, ewkaliptolyň karvon ýa-da limonen bilen we limoneneniň eudesmol ýa-da malation bilen birleşmeleri antagonistik larwisid täsirlerini görkezdi. Galan alty kombinasiýa üçin garaşylýan we synlanan ölümleriň arasynda düýpli tapawut ýokdy (5-nji tablisa).
Sinergik täsirlere we ölümden soňky dozalara esaslanyp, olaryň köp sanly Aedes aegypti çybynlaryna garşy liçinka öldüriji toksikligi ahyrsoňy saýlanyp alyndy we has giňişleýin synagdan geçirildi. Netijeler ewgenol-limonen, diallil disulfid-limonen we diallil disulfid-timephos ikilik kombinasiýalaryny ulanmak arkaly synlanan liçinka ölüminiň 100%, garaşylýan liçinka ölüminiň bolsa degişlilikde 76,48%, 72,16% we 63,4% bolandygyny görkezdi (6-njy tablisa). . Limonen we eudesmol kombinasiýasynyň täsiri has pes boldy, 24 sagatlyk täsir döwründe liçinka ölüminiň 88% -i syn edildi (6-njy tablisa). Gysgaça aýdylanda, saýlanan dört ikilik kombinasiýa uly möçberde ulanylanda Aedes aegypti-ä garşy sinergetik liçinka öldüriji täsirleri hem görkezdi (6-njy tablisa).
Uly ýaşly Aedes aegypti-niň uly populýasiýalaryny gözegçilikde saklamak üçin uly ýaşlylara garşy biosynag üçin üç sinergetik kombinasiýa saýlanyldy. Uly mör-möjek koloniýalarynda synag geçirmek üçin kombinasiýalary saýlamak üçin ilki bilen iki iň gowy sinergetik terpen kombinasiýalaryna, ýagny karvon + limonen we ewkaliptol + eudesmol kombinasiýalaryna ünsi jemledik. Ikinjiden, iň gowy sinergetik kombinasiýa sintetiki organofosfat malatýonynyň we terpenoidleriň kombinasiýasyndan saýlandy. Biz malatýon we eudesmol kombinasiýasynyň iň ýokary syn edilen ölüm derejesi we dalaşgär maddalaryň LC50 gymmatlyklarynyň örän pes bolmagy sebäpli uly mör-möjek koloniýalarynda synag etmek üçin iň gowy kombinasiýadygyna ynanýarys. Malatýon α-pinen, diallil disulfid, ewkalipt, karvon we eudesmol bilen kombinasiýada sinergizm görkezýär. Emma LC50 gymmatlyklaryna seretsek, Eudesmol iň pes gymmata eýedir (2.25 ppm). Malatýonyň, α-pineniň, diallil disulfidiň, ewkaliptolyň we karwonyň hasaplanan LC50 gymmatlyklary degişlilikde 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 we 140.79 ppm boldy. Bu gymmatlyklar malatýonyň we eudesmolyň utgaşmasynyň dozasy babatda iň gowy utgaşmadygyny görkezýär. Netijeler karwonyň limonen bilen we eudesmolyň malatýonyň utgaşmasynda ölüm derejesiniň 100% bolandygyny, ölüm derejesiniň bolsa 61% -den 65% -e çenli bolandygyny görkezdi. Başga bir utgaşma, eudesmolyň we ewkaliptolyň utgaşmasy, ölüm derejesiniň 24 sagatlyk täsirden soň 78.66% bolandygyny, ölüm derejesiniň bolsa 60% bolandygyny görkezdi. Saýlanan üç utgaşmanyň hemmesi uly ýaşly Aedes aegypti-e garşy uly möçberde ulanylanda hem sinergetik täsirleri görkezdi (6-njy tablisa).
Bu gözlegde, Mp, As, Os, Em we Cl ýaly saýlanan ösümlik EO-lary Aedes aegypti-niň liçinka we ululyk tapgyrlaryna ölüm howply täsirlerini görkezdi. Mp EO-nyň liçinka öldüriji täsiri iň ýokary bolup, LC50 gymmaty 0,42 ppm boldy, ondan soň As, Os we Em EO-lary 24 sagatdan soň LC50 gymmaty 50 ppm-den az boldy. Bu netijeler çybynlaryň we beýleki dipteran çybynlaryň öňki gözleglerine gabat gelýär10,11,12,13,14. Cl-iň liçinka öldüriji täsiri beýleki efir ýaglaryndan pes bolsa-da, LC50 gymmaty 24 sagatdan soň 163,65 ppm bolsa-da, onuň ululyk potensialy 24 sagatdan soň LC50 gymmaty 23,37 ppm bolup, iň ýokarydyr. Mp, As we Em EO-lary hem 24 sagat täsir edende LC50 gymmatlyklary bilen 100–120 ppm aralygynda gowy allergiki potensial görkezdiler, ýöne olaryň liçinka öldüriji täsirinden has pesdi. Beýleki tarapdan, EO O-lar iň ýokary terapewtiki dozada hem az sanly allergiki täsir görkezdi. Şeýlelik bilen, netijeler etilen oksidiniň ösümlikler üçin zäherliliginiň çybynlaryň ösüş tapgyryna baglylykda üýtgeýändigini görkezýär15. Bu, şeýle hem EO-laryň mör-möjekleriň bedenine aralaşma tizligine, olaryň belli bir maksatly fermentler bilen özara täsirine we her ösüş tapgyrynda çybynlaryň detoksifikasiya ukybyna baglydyr16. Köp sanly gözlegler esasy komponent birleşmesiniň etilen oksidiniň biologik işjeňliginde möhüm faktor bolup durýandygyny görkezdi, sebäbi ol umumy birleşmeleriň köpüsini düzýär3,12,17,18. Şonuň üçin biz her bir EO-da iki esasy birleşme göz öňünde tutduk. GC-MS netijelerine esaslanyp, diallil disulfid we diallil trisulfid EO As-yň esasy birleşmeleri hökmünde kesgitlenildi, bu bolsa öňki hasabatlara gabat gelýär19,20,21. Öňki hasabatlarda mentolyň onuň esasy birleşmeleriniň biridigi görkezilse-de, karwon we limonen ýene-de Mp EO22,23-iň esasy birleşmeleri hökmünde kesgitlenildi. Os EO-nyň düzüm profili ewgenolyň we metil ewgenolyň esasy birleşmelerdigini görkezdi, bu bolsa öňki ylmy barlagçylaryň netijelerine meňzeş16,24. Ewkaliptol we ewkaliptol Em ýaprak ýagynda bar bolan esasy birleşmeler hökmünde habar berildi, bu käbir ylmy barlagçylaryň netijelerine laýyk gelýär25,26, ýöne Olalade we beýlekileriň netijelerine ters gelýär27. Melaleuka efir ýagynda sineolyň we α-pineniň agdyklyk etmegi syn edildi, bu bolsa öňki barlaglara meňzeş28,29. Dürli ýerlerde şol bir ösümlik görnüşinden alynýan efir ýaglarynyň düzüminde we konsentrasiýasynda dürli görnüşlerdäki tapawutlar barada habar berildi we bu gözlegde hem syn edildi, olar geografik ösümlik ösüş şertlerine, hasyl ýygnamak wagtyna, ösüş tapgyryna ýa-da ösümlik ýaşyna, himotipleriň görnüşine we ş.m. täsir edýär.22,30,31,32. Soňra anyklanan esasy birleşmeler satyn alyndy we olaryň liçinka öldüriji täsirleri we ulular Aedes aegypti çybynlaryna täsirleri synagdan geçirildi. Netijeler dialil disulfidiň liçinka öldüriji işjeňliginiň çig EO As bilen deňeşdirilip bilinýändigini görkezdi. Emma dialil trisulfidiň işjeňligi EO As-dan ýokary. Bu netijeler Kimbaris we beýlekiler tarapyndan Culex philippines-de alnan netijelere meňzeşdir. Şeýle-de bolsa, bu iki birleşme nyşana çybynlara garşy gowy awtosid işjeňligini görkezmedi, bu bolsa Plata-Rueda we beýlekiler tarapyndan Tenebrio molitor-da geçirilen netijeler bilen gabat gelýär. Os EO Aedes aegypti-niň liçinka tapgyryna garşy täsirlidir, ýöne ulular tapgyryna garşy däl. Esasy aýratyn birleşmeleriň liçinka öldüriji işjeňliginiň çig Os EO-dan pesdigi anyklandy. Bu beýleki birleşmeleriň we olaryň çig etilen oksidinde özara täsirleriniň rolyny aňladýar. Metil ewgenolyň özi az işjeňlige eýedir, ewgenolyň özi bolsa ortaça liçinka öldüriji işjeňlige eýedir. Bu netije, bir tarapdan, 35,36 tassyklaýar, beýleki tarapdan bolsa, öňki ylmy işgärleriň netijelerine ters gelýär37,38. Ewgenolyň we metil ewgenolyň funksional toparlaryndaky tapawutlar bir maksatly mör-möjek üçin dürli zäherliliklere sebäp bolup biler39. Limoneniň ortaça liçinka öldüriji işjeňlige eýedigi anyklandy, karwonyň täsiri bolsa az boldy. Şonuň ýaly-da, limoneniň ulular üçin zäherliliginiň pesligi we karwonyň ýokary zäherliligi öňki käbir barlaglaryň netijelerini goldaýar40, ýöne beýlekilerine ters gelýär41. Iki siklikli we ekzosikliki pozisiýalarda goşa baglanyşyklaryň bolmagy bu birleşmeleriň larwisidler hökmünde peýdasyny artdyryp biler3,41, doýmadyk alfa we beta uglerodly keton bolan karwon bolsa ulularda zäherliligiň has ýokary mümkinçiligini görkezip biler42. Şeýle-de bolsa, limonen we karwonuň aýratyn aýratynlyklary umumy EO Mp-den has pes (1-nji tablisa, 3-nji tablisa). Synagdan geçirilen terpenoidleriň arasynda eudesmolyň LC50 gymmaty 2,5 ppm-den aşak bolan iň uly larwisid we ulular üçin işjeňlige eýe bolandygy anyklandy, bu bolsa ony Aedes çybynlaryna garşy göreşmek üçin geljegi uly birleşmä öwürýär. Onuň öndürijiligi tutuş EO Em-den has gowy, emma bu Çeng we beýlekileriň netijeleri bilen gabat gelmeýär40. Eudesmol iki izopren birligi bolan seskwiterpen bolup, ewkalipt ýaly kislorodly monoterpenlerden has az uçujydyr we şonuň üçin pestisid hökmünde has uly mümkinçilike eýedir. Ewkaliptolyň özi larwisid täsirinden has uly we öňki gözlegleriň netijeleri muny goldaýar we inkär edýär37,43,44. Diňe işjeňlik tutuş EO Cl-iň işjeňligi bilen deňeşdirip bolýar. Başga bir bisiklik monoterpen, α-pinen, Aedes aegypti-e uly täsirinden has az, larwisid täsirinden has az täsir edýär, bu bolsa doly EO Cl-iň täsiriniň tersinedir. Terpenoidleriň umumy insektisid işjeňligine olaryň lipofilligi, üýtgeýänligi, uglerod şahalanmagy, proýeksiýa meýdany, ýüz meýdany, funksional toparlar we olaryň ýerleşýän ýerleri täsir edýär45,46. Bu birleşmeler öýjük toplanmalaryny ýok etmek, dem alyş işjeňligini blokirlemek, nerw impulslarynyň geçirilmegini kesmek we ş.m. arkaly täsir edip bilerler.47 Sintetiki organofosfat Temephos iň ýokary larwisid işjeňligine eýe bolup, LC50 gymmaty 0,43 ppm boldy, bu bolsa Lekiň maglumatlaryna laýyk gelýär - Utala48. Sintetiki organofosfor malationynyň uly işjeňligi 5,44 ppm diýlip habar berildi. Bu iki organofosfat Aedes aegypti-niň laboratoriýa ştammlaryna garşy oňyn täsir görkezse-de, dünýäniň dürli künjeklerinde çybynlaryň bu birleşmelere garşy durmagy barada habar berildi49. Şeýle-de bolsa, ösümlik dermanlaryna garşy durmagyň ösüşi barada meňzeş habarlar tapylmady50. Şeýlelik bilen, ösümlikler wektorlara garşy göreş maksatnamalarynda himiki pestisidlere alternatiwa hökmünde garalýar.
Liçinkalara garşy täsiri güýçli terpenoidlerden we timetfosly terpenoidlerden taýýarlanan 28 binar kombinasiýada (1:1) synagdan geçirildi we 9 kombinasiýa sinergetik, 14 antagonistik we 5 antagonistik bolup çykdy. Täsir ýok. Beýleki tarapdan, ulular üçin täsir biosynagynda 7 kombinasiýa sinergetik, 15 kombinasiýa antagonistik we 6 kombinasiýanyň täsir etmeýändigi habar berildi. Käbir kombinasiýalaryň sinergetik täsir bermeginiň sebäbi dalaşgär birleşmeleriň dürli möhüm ýollarda bir wagtda özara täsirleşmegi ýa-da belli bir biologik ýoluň dürli esasy fermentleriniň yzygiderli basylyp saklanmagy bilen baglanyşykly bolup biler51. Limoneniň diallil disulfid, ewkalipt ýa-da ewgenol bilen utgaşdyrylmagynyň kiçi we uly göwrümli ulanylyşlarda sinergetikdigi anyklandy (6-njy tablisa), onuň ewkalipt ýa-da α-pinen bilen utgaşdyrylmagynyň bolsa liçinkalara antagonistik täsir edýändigi anyklandy. Ortaça aýdylanda, limonen gowy sinergist bolup görünýär, belki-de metil toparlarynyň bolmagy, gatlak gatlagyna gowy aralaşma we täsir etmegiň başga mehanizmi sebäplidir52,53. Öň limoneniň mör-möjekleriň kütikulalaryna aralaşmak (kontakt toksikligi), iýmit siňdiriş ulgamyna täsir etmek (antifedant) ýa-da dem alyş ulgamyna täsir etmek (fumigasiýa işjeňligi) arkaly zäherli täsirleri döredip biljekdigi barada habar berildi54, ewgenol ýaly fenilpropanoidleriň bolsa metabolik fermentlere täsir edip biljekdigi 55. Şonuň üçin dürli täsir mehanizmleri bolan birleşmeleriň utgaşmasy garyndynyň umumy öldüriji täsirini artdyryp biler. Ewkaliptolyň dialil disulfid, ewkalipt ýa-da α-pinen bilen sinergetikdigi anyklandy, ýöne beýleki birleşmeler bilen beýleki utgaşmalar ýa larwisid däl, ýa-da antagonistikdi. Irki barlaglar ewkaliptolyň asetilholinesteraza (AChE), şeýle hem oktaamin we GABA reseptorlaryna garşy tormozlaýjy işjeňliginiň bardygyny görkezdi56. Siklik monoterpenler, ewkaliptol, ewgenol we ş.m. olaryň neýrotoksik işjeňligi bilen birmeňzeş täsir mehanizmine eýe bolup bilýändigi sebäpli, 57 şeýlelik bilen özara tormozlamak arkaly olaryň bilelikdäki täsirlerini azaltmaga mümkinçilik berýär. Şeýle hem, Temephosyň diallil disulfid, α-pinen we limonen bilen utgaşdyrylmagynyň sinergetikdigi anyklandy, bu bolsa ösümlik önümleri bilen sintetiki organofosfatlaryň arasyndaky sinergetik täsir baradaky öňki habarlary goldaýar58.
Eudesmol we ewkaliptolyň utgaşmasynyň Aedes aegypti-niň liçinka we ulular tapgyrlaryna sinergetik täsir edýändigi anyklandy, munuň sebäbi olaryň dürli himiki gurluşlary sebäpli dürli täsir ediş usullary bilen baglanyşykly bolmagy mümkin. Eudesmol (seskwiterpen) dem alyş ulgamyna 59 täsir edip biler we ewkaliptol (monoterpen) asetilholinesteraza 60 täsir edip biler. Ingredientleriň iki ýa-da has köp nyşana ýerlere bilelikde täsir etmegi utgaşmanyň umumy öldüriji täsirini güýçlendirip biler. Uly maddalaryň bioanalizlerinde malatýonyň karwone ýa-da ewkaliptol ýa-da ewkaliptol ýa-da diallil disulfid ýa-da α-pinen bilen sinergetik täsir edýändigi anyklandy, bu bolsa onuň limonen we di goşulanda sinergetik täsir edýändigini görkezýär. Allil trisulfidden başga, terpen birleşmeleriniň tutuş portfeli üçin gowy sinergetik allergist kandidatlary. Thangam we Kathiresan61 hem malationyň ösümlik ekstraktlary bilen sinergetik täsiriniň meňzeş netijelerini habar berdiler. Bu sinergetik reaksiýa malationyň we fitokimiýalaryň mör-möjekleri zyýansyzlandyrýan fermentlere bilelikdäki zäherli täsiri bilen baglanyşykly bolup biler. Malation ýaly organofosfatlar, adatça, sitohrom P450 esterazalaryny we monooksigenazalaryny 62,63,64 basyp ýatyrmak arkaly hereket edýär. Şonuň üçin, malationy bu täsir mehanizmleri bilen we terpenleri dürli täsir mehanizmleri bilen utgaşdyrmak çybynlara umumy ölüm howply täsirini güýçlendirip biler.
Beýleki tarapdan, antagonizm saýlanan birleşmeleriň birleşdirilende her bir birleşmeden has az işjeňdigini görkezýär. Käbir birleşmelerde antagonizmiň sebäbi, bir birleşmäniň siňdirilişiniň, paýlanyşynyň, metabolizminiň ýa-da bölünip çykarylyşynyň tizligini üýtgetmek arkaly beýleki birleşmäniň hereketini üýtgetmegi bolup biler. Ilkinji barlagçylar muny derman birleşmelerinde antagonizmiň sebäbi hasaplaýardylar. Molekulalar Mümkin mehanizm 65. Şonuň ýaly-da, antagonizmiň mümkin sebäpleri meňzeş täsir mehanizmleri, şol bir reseptor ýa-da maksatly ýer üçin düzüm birleşmeleriniň bäsdeşligi bilen baglanyşykly bolup biler. Käbir ýagdaýlarda, maksatly belogyň bäsdeşliksiz basylyp saklanmagy hem ýüze çykyp biler. Bu gözlegde iki organosülfür birleşmesi, diallil disulfid we diallil trisulfid, ähtimal, şol bir maksatly ýer üçin bäsdeşlik sebäpli antagonistik täsirleri görkezdi. Şeýle hem, bu iki kükürt birleşmesi antagonistik täsirleri görkezdi we eudesmol we α-pinen bilen birleşdirilende hiç hili täsir etmedi. Eudesmol we alfa-pinen sikliki häsiýete eýedir, diallil disulfid we diallil trisulfid bolsa alifatik häsiýete eýedir. Himiki gurluşa esaslanyp, bu birleşmeleriň utgaşmasy umumy ölüm howply işjeňligi artdyrmaly, sebäbi olaryň nyşana ýerleri adatça dürli-dürli bolýar34,47, ýöne tejribe arkaly biz bu birleşmeleriň käbir näbelli organizmlerde in vivo ulgamlarynda özara täsirleşme netijesinde oýnaýan roly bilen baglanyşykly bolup biljek antagonizmi tapdyk. Şonuň ýaly-da, sineol we α-pinen utgaşmasy antagonistik reaksiýalary döretdi, emma barlagçylar ozal iki birleşmäniň dürli täsir nyşanalarynyň bardygyny habar berdiler47,60. Iki birleşme hem sikliki monoterpenler bolany üçin, baglanyşmak üçin bäsleşip, öwrenilen kombinator jübütleriň umumy zäherliligine täsir edip biljek käbir umumy nyşana ýerleri bolup biler.
LC50 gymmatlyklaryna we syn edilen ölüme esaslanyp, iň gowy iki sinergetik terpen kombinasiýalary saýlanyldy, ýagny karvon + limonen we ewkaliptol + eudesmol jübütleri, şeýle hem terpenler bilen sintetiki organofosfor malationy. Malation + Eudesmol birleşmeleriniň optimal sinergetik kombinasiýalary ulular üçin insektisid biosynagynda synagdan geçirildi. Bu netijeli kombinasiýalaryň uly täsir giňişliginde köp sanly şahslara garşy işläp biljekdigini ýa-da edip bilmejekdigini tassyklamak üçin uly mör-möjek koloniýalaryny nyşana alyň. Bu kombinasiýalaryň hemmesi mör-möjekleriň uly sürülerine garşy sinergetik täsir görkezýär. Aedes aegypti liçinkalarynyň uly populýasiýalaryna garşy synagdan geçirilen optimal sinergetik liçinka garşy kombinasiýa üçin meňzeş netijeler alyndy. Şeýlelik bilen, ösümlik EO birleşmeleriniň netijeli sinergetik liçinka garşy we ulular üçin kombinasiýasynyň bar bolan sintetiki himiki maddalara garşy güýçli kandidatdygyny we Aedes aegypti populýasiýalaryny gözegçilikde saklamak üçin mundan beýläk-de ulanylyp biljekdigini aýtmak bolar. Şeýle hem, sintetiki larwisidleriň ýa-da uly ýaşlylara garşy dermanlaryň terpenler bilen netijeli utgaşmalary çybynlara berilýän timetfosyň ýa-da malatýonyň dozasyny azaltmak üçin hem ulanylyp bilner. Bu güýçli sinergetik utgaşmalar Aedes çybynlarynda derman garşylygynyň ösüşi boýunça geljekki barlaglar üçin çözgütleri hödürläp biler.
Aedes aegypti ýumurtgalary Hindistanyň Lukmançylyk Barlaglary Geňeşiniň Dibrugarh şäherindäki Sebitleýin Lukmançylyk Barlag Merkezinden ýygnaldy we Gauhati uniwersitetiniň Zoologiýa bölüminde aşakdaky şertlerde gözegçilik edilýän temperaturada (28 ± 1 °C) we çyglylykda (85 ± 5%) saklandy: Ariwoli we beýlekiler beýan edildi. Ýumurtgadan çykandan soň, liçinkalara liçinka iýmiti (it biskwit poroşogy we drožži 3:1 gatnaşykda) berildi we ulularyna 10% glýukoza ergini berildi. Çyrtyk çykandan soň 3-nji günden başlap, ulularyna urkaçy çybynlara albinos syçanlaryň ganyny sormaga rugsat berildi. Süzgüç kagyzyny stakandaky suwa batyryň we ýumurtga goýýan gabaga goýuň.
Saýlanan ösümlik nusgalary, ýagny ewkalipt ýapraklary (Myrtaceae), mukaddes reýhan (Lamiaceae), ýalpyz (Lamiaceae), melaleuka (Myrtaceae) we allium soganlary (Amaryllidaceae). Guwahatiden ýygnalyp, Gauhati uniwersitetiniň Botanika bölümi tarapyndan kesgitlenildi. Ýygnalan ösümlik nusgalary (500 g) 6 sagatlap Clevenger enjamy arkaly gidrodistilýasiýa sezewar edildi. Çykarylan EO arassa aýna flakonlarda ýygnaldy we goşmaça öwrenmek üçin 4°C-de saklandy.
Liçinkalara garşy zäherlilik Bütindünýä Saglygy Goraýyş Guramasynyň biraz üýtgedilen standart proseduralaryny ulanmak arkaly öwrenildi 67. Emulgator hökmünde DMSO ulanyň. Her bir EO konsentrasiýasy ilki bilen 100 we 1000 ppm-de synagdan geçirildi, her gaýtalamada 20 liçinka ýüze çykaryldy. Netijelere esaslanyp, konsentrasiýa aralygy ulanyldy we ölüm 1 sagatdan 6 sagada çenli (1 sagat aralyk bilen) we bejergiden soň 24 sagat, 48 sagat we 72 sagatda hasaba alyndy. Ölümden soňky konsentrasiýalar (LC50) 24, 48 we 72 sagat täsirden soň kesgitlenildi. Her bir konsentrasiýa üç esse, bir negatiw gözegçilik (diňe suw) we bir oňyn gözegçilik (DMSO bilen işlenen suw) bilen synagdan geçirildi. Eger pupasiýa ýüze çyksa we gözegçilik toparynyň liçinkalarynyň 10% -den gowragy ölse, synag gaýtalanýar. Eger gözegçilik toparynda ölüm derejesi 5-10% aralygynda bolsa, Abbott düzediş formulasyny ulanyň 68.
Ramar we beýlekiler tarapyndan beýan edilen usul 69 ergin hökmünde aseton ulanylyp, ulular üçin Aedes aegypti çybynlaryna garşy biosynag üçin ulanyldy. Her bir EO ilki bilen 100 we 1000 ppm konsentrasiýalarynda ulular üçin Aedes aegypti çybynlaryna garşy synagdan geçirildi. Taýýarlanan her erginiň 2 ml-ni Whatman sanyna çalyň. 1 bölek filtr kagyzy (ölçegi 12 x 15 sm2) we asetonyň 10 minutlap buharlanmagyna rugsat beriň. Diňe 2 ml aseton bilen işlenen filtr kagyzy gözegçilik hökmünde ulanyldy. Aseton buharlanandan soň, işlenen filtr kagyzy we gözegçilik filtr kagyzy silindrik turba (10 sm çuňlukda) ýerleşdirilýär. Gan iýmeýän 3-4 günlük on sany çybyn her konsentrasiýanyň üç nusgasyna geçirildi. Deslapky synaglaryň netijelerine esaslanyp, saýlanan ýaglaryň dürli konsentrasiýalary synagdan geçirildi. Ölüm derejesi çybyn goýberilenden 1 sagat, 2 sagat, 3 sagat, 4 sagat, 5 sagat, 6 sagat, 24 sagat, 48 sagat we 72 sagat soň hasaba alyndy. 24 sagat, 48 sagat we 72 sagatlyk täsir wagty üçin LC50 gymmatlyklaryny hasaplaň. Eger gözegçilik toparynda ölüm derejesi 20% -den geçse, tutuş synagy gaýtalaň. Şeýle hem, eger gözegçilik toparynda ölüm derejesi 5% -den ýokary bolsa, bejerilen nusgalaryň netijelerini Abbott formulasyny ulanyp düzediň68.
Saýlanan efir ýaglarynyň düzüm birleşmelerini seljermek üçin gaz hromatografiýasy (Agilent 7890A) we massa spektrometriýasy (Accu TOF GCv, Jeol) geçirildi. GK FID detektory we kapillýar sütün (HP5-MS) bilen enjamlaşdyryldy. Daşaýjy gaz geliýdi, akym tizligi 1 ml/min. GC maksatnamasy Allium sativum-y 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M we Ocimum Sainttum-y 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, ýalpyz üçin 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, ewkalipt üçin 20.60-1M-10-200-3M-30-280 we gyzyl üçin 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M diýip sazlaýar. Müň gatlak üçin olar 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Her bir EO-nyň esasy birleşmeleri GC hromatogrammasyndan we massa spektrometriýasynyň netijelerinden hasaplanan meýdan prosentine esaslanyp kesgitlenildi (NIST 70 standartlarynyň maglumat bazasyna salgylanyldy).
Her bir EO-daky iki esasy birleşme GC-MS netijelerine esaslanyp saýlandy we goşmaça biosynaglar üçin Sigma-Aldrich-den 98–99% arassalykda satyn alyndy. Birleşmeler ýokarda beýan edilişi ýaly, Aedes aegypti-e garşy larwisid we ulular üçin netijeliligi synagdan geçirildi. Iň köp ulanylýan sintetiki larwisidler tamefosaty (Sigma Aldrich) we ulular üçin malathion dermany (Sigma Aldrich), şol bir prosedura laýyklykda, saýlanan EO birleşmeleri bilen netijeliligini deňeşdirmek üçin seljerildi.
Saýlanan terpen birleşmeleriniň we terpen birleşmeleriniň, şeýle hem täjirçilik organofosfatlarynyň (tilefos we malation) ikilik garyndylary her bir dalaşgär birleşmesiniň LC50 dozasyny 1:1 gatnaşykda garyşdyrmak arkaly taýýarlanyldy. Taýýarlanan birleşmeler ýokarda beýan edilişi ýaly Aedes aegypti-niň liçinka we ululyk tapgyrlarynda synagdan geçirildi. Her bir biosynag her bir birleşme üçin üç gezek we her bir birleşmede bar bolan aýratyn birleşmeler üçin üç gezek geçirildi. Nyşana alnan mör-möjekleriň ölümi 24 sagatdan soň hasaba alyndy. Aşakdaky formulany ulanyp, ikilik garyndy üçin garaşylýan ölüm derejesini hasaplaň.
bu ýerde E = ikilik birleşme, ýagny baglanyşyk (A + B) sebäpli Aedes aegypti çybynlarynyň garaşylýan ölüm derejesi.
Her ikilik garyndynyň täsiri Pavla52 tarapyndan beýan edilen usul bilen hasaplanan χ2 gymmatyna esaslanyp, sinergetik, antagonistik ýa-da täsirsiz diýlip belgilendi. Her bir kombinasiýa üçin χ2 gymmatyny aşakdaky formula arkaly hasaplaň.
Hasaplanan χ2 gymmaty degişli erkinlik derejeleri üçin tablisa gymmatyndan (95% ynam aralygy) uly bolanda we synlanan ölümiň garaşylýan ölümden ýokary bolandygy anyklanylanda, kombinasiýanyň täsiri sinergetik hökmünde kesgitlenildi. Şonuň ýaly-da, islendik kombinasiýa üçin hasaplanan χ2 gymmaty käbir erkinlik derejeleri bolan tablisa gymmatyndan ýokary bolsa, ýöne synlanan ölüm garaşylýan ölümden pes bolsa, bejergi antagonistik hasaplanýar. Eger islendik kombinasiýada χ2-niň hasaplanan gymmaty degişli erkinlik derejelerindäki tablisa gymmatyndan az bolsa, kombinasiýanyň täsiri ýok hasaplanýar.
Köp sanly mör-möjeklere garşy synag geçirmek üçin üç-dört sany potensial sinergetik kombinasiýa (100 liçinka we 50 liçinka öldüriji we ululy mör-möjek işjeňligi) saýlanyldy. Uly ýaşly mör-möjekler ýokardaky ýaly dowam edýärler. Garyndylar bilen birlikde, saýlanan garyndylarda bar bolan aýry-aýry birleşmeler hem deň mukdarda Aedes aegypti liçinkalarynda we ulularynda synagdan geçirildi. Kombinasiýa gatnaşygy bir dalaşgär birleşmäniň bir bölegi LC50 dozasy we beýleki düzüm bölegi birleşmäniň bir bölegi LC50 dozasydyr. Uly ýaşly mör-möjek işjeňlik biosynagynda saýlanan birleşmeler ergin asetonda eredildi we 1300 sm3 silindrik plastik gapda gaplanan süzgüç kagyzyna çalyndy. Aseton 10 minutlap buharlandy we ululy mör-möjekler boşadyldy. Şonuň ýaly-da, liçinka öldüriji biosynagynda LC50 dalaşgär birleşmeleriniň dozalary ilki deň mukdarda DMSO-da eredildi we soňra 1300 sm3 plastik gaplarda saklanýan 1 litr suw bilen garyşdyryldy we liçinkalar boşadyldy.
LC50 gymmatlyklaryny hasaplamak üçin SPSS (16-njy wersiýa) we Minitab programma üpjünçiligini ulanyp, 71 hasaba alnan ölüm maglumatlarynyň ähtimallyk seljermesi geçirildi.
Ýerleşdirilen wagty: 2024-nji ýylyň 1-nji iýuly